HPLC基線漂移是指在高效液相色譜（HPLC）分析中，基線隨時(shí)間發(fā)生不穩(wěn)定變化的現(xiàn)象。這種現(xiàn)象可能掩蓋真實(shí)的樣品信號，導(dǎo)致分析結(jié)果不準(zhǔn)確。以下是導(dǎo)致HPLC基線漂移的幾個(gè)主要因素：
1. **柱溫和流動相溫度波動**：
* 對于部分檢測器，尤其是示差折光檢測器或高靈敏度的紫外檢測器，柱溫和流動相的溫度波動可能導(dǎo)致基線有規(guī)律的上升和下降。
* 解決方法：控制好柱子和流動相的溫度，可以在進(jìn)入檢測器前使用熱交換器或在檢測器之前進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)。
2. **流動相不均勻、污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成**：
* 流動相的不均勻性、污染、變質(zhì)或使用低品質(zhì)溶劑可能導(dǎo)致基線漂移。
* 解決方法：使用HPLC級的溶劑和高純度的鹽和添加劑，對流動相進(jìn)行脫氣處理。定期檢查流動相的組成，確保其品質(zhì)。
3. **流通池污染或有氣體**：
* 檢測器流通池的污染或存在氣體可能導(dǎo)致基線漂移。
* 解決方法：采用極性強(qiáng)的溶劑（如甲醇）對檢測池進(jìn)行沖洗。如有必要，可以使用1N濃度的稀硝酸進(jìn)行沖洗（注意避免使用鹽酸，且不要接PEEK接頭）。
4. **色譜柱平衡不充分**：
* 色譜柱平衡不充分，尤其是更換流動相時(shí)，可能導(dǎo)致基線漂移。
* 解決方法：采用中極性強(qiáng)度的溶液，在分析前對色譜柱進(jìn)行沖洗，沖洗的體積通常需要達(dá)到10\~20倍的色譜柱體積。
5. **樣品中的強(qiáng)保留物質(zhì)**：
* 樣品中存在強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）可能以饅頭峰樣被洗脫出，表現(xiàn)為基線的抬升。
* 解決方法：使用保護(hù)柱，并在必要時(shí)定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
6. **檢測器設(shè)置問題**：
* 檢測器設(shè)置不當(dāng)，如波長未調(diào)整至最大吸收波長處，也可能導(dǎo)致基線漂移。
* 解決方法：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整檢測器的設(shè)置，確保波長等參數(shù)正確。
7. **設(shè)備老化和操作技術(shù)水平**：
* 設(shè)備長時(shí)間使用后可能出現(xiàn)老化現(xiàn)象，如柱子老化、傳感器性能下降等，這些都可能導(dǎo)致基線漂移。
* 操作技術(shù)水平不夠熟練或設(shè)備調(diào)整不當(dāng)也可能導(dǎo)致基線漂移。
* 解決方法：定期檢查和維護(hù)設(shè)備，確保設(shè)備處于良好狀態(tài)。同時(shí)，提高操作技術(shù)水平，確保正確調(diào)整和使用設(shè)備。
綜上所述，導(dǎo)致HPLC基線漂移的因素多種多樣，需要綜合考慮并采取相應(yīng)的解決措施。在實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)密切關(guān)注基線變化，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題并采取措施進(jìn)行糾正，以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
