分析方法學驗證中的檢測限和定量限

分析方法學驗證是對某種分析方法的性能進行評估和確認的過程，目的是確保該方法在特定的條件下能夠準確、可靠地測量目標分析物。在這一過程中，檢測限（Limit of Detection，LOD）與定量限（Limit of Quantification，LOQ）是兩個至關重要的參數，它們在評估分析方法的靈敏度、可靠性和有效性方面發揮著關鍵作用。

一、檢測限（LOD）

定義：檢測限是指試樣中被測物能被檢測出的最低量，它僅作為限度試驗指標和定性鑒別的依據，沒有定量意義。因此，在檢出限附近不能進行準確的定量，且報告未檢出時應附上方法的檢測限。需要注意的是，不同文獻或實驗室中，檢測限可能也稱為Detection Limit（DL），具體術語應遵循各機構的規定。此外，在某些國際質量檢驗報告中，LOD可能表示干燥失重（Loss On Drying），因此需特別注意區分。

確定方法：

直觀法：通過使用已知濃度的待測物質，找出能被可靠檢測到的最低濃度。例如，在薄層色譜（TLC）法中，可以制作一系列已知濃度的樣品，逐步測試，直到能明顯看到斑點為止。

標準偏差和標準曲線法：通過多次測定空白樣品和建立標準曲線，可以得到響應值的標準偏差（σ）和標準曲線的斜率（S）。計算公式為LOD=3.3×σ/S。

信噪比法：此方法適用于能顯示基線噪聲的分析技術，如色譜法。通過測定已知低濃度樣品的信號，并與空白樣品的信號進行比較，可以計算出能被可靠檢測出的最低濃度。一般來說，當信噪比達到3:1時，此時的濃度被視為檢測限。

二、定量限（LOQ）

定義：定量限是指試樣中被測物能被定量測定的最低量。對于微量或痕量藥物分析、定量測定藥物雜質和降解產物時，應確定方法的定量限。需要注意的是，定量限的測定結果應符合準確度和精密度要求，同時定量限的濃度通常應小于或等于報告限的濃度，以確保報告數值的準確可靠。與檢測限類似，定量限在某些文獻或實驗室中也可能稱為Quantitation Limit（QL）。

確定方法：

直觀法：與檢測限的直觀法類似，但更注重于確定能夠進行準確定量測定的最低濃度。

標準偏差和標準曲線法：計算公式為LOQ=10×σ/S。與檢測限的計算公式類似，但系數不同，以反映定量測定對準確度和精密度的更高要求。

信噪比法：在信噪比為10:1時的濃度被視為定量限。這一比例的選擇是為了確保在定量測定時具有足夠的信號強度和穩定性。

三、檢測限與定量限的區別與聯系

區別：

檢測限主要用于定性鑒別和限度試驗，沒有定量意義；而定量限則用于準確測定被測物的含量。

在數值上，定量限通常高于檢測限，因為定量測定需要更高的信號強度和穩定性。

聯系：

檢測限和定量限都是評估分析方法靈敏度的重要指標。

在實際分析中，通常需要同時考慮檢測限和定量限，以確保分析結果的準確性和可靠性。

四、注意事項

在確定檢測限和定量限時，應嚴格按照相關標準和規范進行操作，以確保結果的準確性和可靠性。

不同的分析方法和儀器可能具有不同的檢測限和定量限，因此在進行方法學驗證時，應針對具體的分析方法和儀器進行評估和確認。

綜上所述，檢測限和定量限在分析方法學驗證中扮演著至關重要的角色。通過科學、準確地確定這兩個參數，可以確保分析方法的靈敏度和可靠性，為實際分析提供有力的支持。