食品中三聚氰胺檢測的固相萃取方法

（Polyclean X-MCX）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC 法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物

三聚氰胺 (CAS: 108-78-1)

三、應用范圍

本方法適用于食品中三聚氰胺的 HPLC 檢測及確證。四、參考標準

推薦性國家標準《GBT 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》五、實驗材料

NuAnalytical Polyclean X-MCX 固相萃取柱 3mL/60mg。六、實驗方法

1、樣品提取

稱取 2.0ｇ試樣（精確至 0.001ｇ）于 50mL 離心管中，加入 15ｍＬ 1%三氯乙酸溶液和

5mL 乙腈，超聲提取 10min，再震蕩提取 10min，以不低于 4000r/min 離心 10min。上清液經(jīng)三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三濾乙酸溶液定溶至 25Ml,移取 5mL 濾液，加入 5mL 水混勻后做帶凈化液。

2、SPE 柱活化

使用前依次用 3mL 甲醇、5mL 水活化柱子。

3、上樣和洗脫

將 2 中的待凈化液轉移至固相萃取柱中。依次用 3mL 水、3mL 甲醇洗滌，抽至近干后， 用 6mL 5%氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過 1mL/min。

4、重新溶解

洗脫液于 50 度下用氮氣吹干，殘留物用 1mL 流動相定溶，渦旋混合 1min，過微孔濾膜后，供 HPLC 測定。

5、HPLC 條件

色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

檢測器：UV@240 nm

流動相： A-離子對試劑緩沖液（準確稱取 2.10g  檸檬酸和 2.16g  辛烷磺酸鈉，加入約

980mL 水溶解，調節(jié)PH 至 3.0 后，定溶至 1L 備用） B-乙腈

洗脫方式：等度洗脫，A:B=80 : 20

柱溫：室溫         進樣體積:20 μL